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公 司:西安交大保赛生物技术股份有限公司
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4B琼脂糖微球    

4B
琼脂糖微球(Bio-Sep 4B)
产品说明书
  4B琼脂糖微球是用4%浓度琼脂糖制备成的球型颗粒,作为凝胶层析介质使用。
  1. 外观
  本品为乳白色球状凝胶,无嗅、无味、无肉眼可见杂质。
  2. 理化指标
项       目
指       标
基质
4%琼脂糖凝胶
排阻极限
60000~20×106 (球蛋白)
形状
球型
粒径
50~160 μm
最高流速
11.5 cm/h*
耐压
0.008 MPa
耐热
pH7水中45℃24h
pH适用范围
4~9 (长时间), 3~11(短时间,在位清洗)
化学稳定性
可耐8mol/L尿素、6mol/L盐酸胍
  *检测条件: 层析柱10mm×300mm  *柱床高15cm,25℃, 流动相为0.1mol/LNaCl
  3. 包装
  产品以聚胺酯瓶密封包装,外贴标签,注明“品名、体积、颗粒大小、保质期、批号、生产日期、生产单位及地址” 等内容。
  4. 贮存
  产品应密封贮存在4℃~25℃(保存溶液为20% 乙醇),通风、干燥、清洁的地方。不能冷冻。
  用过的柱子贮存在4℃(20% 乙醇)。
  5. 注意事项
  本品应避免与氧化剂接触,避免长时间暴露在空气中
  6.运输
  运输中应避免日晒、雨淋、重压,严禁与有毒、有害物品混运。
  7.保质期
  暂定5年。
  8.应用
  本产品为传统的琼脂糖介质,非特异性吸附低,回收率高,可多次重复使用等特点,用于分子量差异大、对分辨率要求不高的样品的凝胶层析纯化。下面简要介绍介质的使用过程。
  8.1 装柱
  凝胶过滤介质的使用对装柱的要求较高,为了保证分离效果,一般通过柱子上加一个装柱器来使分离柱装满凝胶,或采用带有轴向加压装置的柱子。凝胶柱床一般高于60cm。装柱效果可用染料或丙酮-水溶液进行检验。
  以下过程为通用介质装填过程。若为带有轴向加压装置的柱子,可在柱床稳定后将柱床压紧,接好管路。
  ⑴让所有的材料和试剂达到室温。配制缓冲液。凝胶层析上样、平衡和洗脱只用一种低盐浓度的缓冲液。
  ⑵选择一根一定直径的柱子,长约30~60cm,根据柱子大小取所需量的凝胶(约为柱床体积的1.15倍),清洗掉20%乙醇,抽干,用缓冲液(按凝胶:缓冲液=3:1的比例)配成匀浆。匀浆作脱气处理。不要剧烈搅动,以免搅坏微球。
  ⑶将柱内及柱子底端用水或缓冲液润湿并保持一小段液位(液面略高于滤膜),务必使底端无气泡。
  ⑷用玻璃棒引导匀浆沿着柱内壁一次性倒入柱内,注意勿使产生气泡。打开柱子出液口,使凝胶在柱内自由沉降,连结好柱子顶端柱头。
  ⑸打开蠕动泵,让缓冲液缓慢流过,使柱床稳定。
  ⑹最好用一个装柱器辅助装柱。装完后柱床上端轻轻刮平,上好柱头。
  8.2平衡
  让缓冲液以一定流速流过柱子,到流出液电导和pH不变。
  8.3上样
  ⑴样品用缓冲液配制,浑浊的样品要离心和过滤后上样。含盐量过大、浓度过小的样品要先做处理,再上样。
  ⑵介质对样品组分的分离是按组分分子量大小进行的,分子量大的先流出来。
  ⑶上样体积约为柱体积的1~2%,越小分离越好。
  8.4洗脱
  用缓冲液洗脱,洗脱中保持流速、缓冲液组成不变。
  8.5再生
  一般用缓冲液洗到平衡,可再次使用。
  8.6注意:在装柱、使用和保存柱子的时候,始终要避免柱子流干气泡进入。
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